肺腺癌患者表皮生长因子受体基因突变以及不同性别、年龄、转移患者突变分析

周方元 李 艳

非小细胞肺癌(NSCLC)是最常见的恶性肿瘤之一，也是导致癌症患者死亡的主要原因之一[1]，占肺癌总数的80%-85%。由于NSCLC早期诊断困难，临床确诊时大部分已为晚期，手术和放疗难以达到根治性治疗，因而靶向治疗成为患者最为重要的治疗策略。目前，靶向抑制表皮生长因子受体(EGFR)已成为治疗肺癌的里程碑式手段[2]，临床上将EGFR突变作为NSCLC靶向治疗的重要靶点，因此，EGFR突变状态检测对于NSCLC患者治疗尤为重要。肺腺癌为NSCLC中的一种，其具有发病年龄较小、女性患者比例较其它类型NSCLC高、更易发生于不吸烟者[3]、有时早期即发生血行转移等特点，因此了解肺腺癌患者EGFR突变人群分布情况，探讨其与患者年龄、性别及转移的关系，对为临床肺腺癌的患者靶向治疗有一定的价值。本研究检测了230例肺腺癌患者EGFR的突变状态，分析不同性别、年龄及转移患者突变类型的差异，为肺腺癌患者的靶向治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象及分组

收集武汉大学人民医院2016-01—2017-03期间经病理确诊的肺腺癌患者230例，根据性别不同分为男性组(123例)和女性组(107例)；根据患者年龄将患者分为<60岁组(103例)和≥60岁组(127例)；根据其是否发生转移将其分为未转移组(130例)和转移组(100例)。按照性别分组后，男性肺腺癌患者组与女性肺腺癌患者组的年龄(t=0.879，P>0.05)和转移率(χ2=1.45，P>0.05)分布均无统计学差异；按照年龄分组后，<60岁组的肺腺癌患者组与≥60岁组在性别(χ2=0.24，P>0.05)和转移率(χ2=1.98，P>0.05)分布均无统计学差异；按照转移与否分组后，转移组和未转移组性别(χ2=1.45，P>0.05)和年龄(t=0.532，P>0.05)分布均无统计学差异。

1.2 纳入和排除标准

纳入标准：(1)术后病理确诊为肺腺癌；(2)无其它部位的原发恶性肿瘤病史。排除标准：(1)无法获得病理切片的患者；(2)诊断不明确的患者；(3)同时患有其它部位原发性恶性肿瘤的患者。

1.3 检测方法

人类EGFR基因突变检测试剂盒购自武汉海吉力生物科技有限公司(货号：HGN-eg01)，其基本原理是采用ARMS-PNA技术[4]，结合荧光PCR平台，针对中国人群EGFR突变率进行突变位点的选择，检测包括G719X、19del、T790M、S768I、20ins、L858R、L861Q在内的中国人群常见EGFR突变位点。检测所用样本类型为石蜡包埋组织的病理切片，样本保存时间均未超过3年。主要检测步骤依次为核酸提取、配置检测数+2个反应体系、分装至PCR管，每管18μl、加样2μl、上机检测和结果分析。

1.4 统计学处理

2 结 果

2.1 肺腺癌患者EGFR基因突变类型分布

230例肺腺癌患者中，EGFR野生型为107例(46.52%)，EGFR突变型为123例(53.58%)。在突变型肺腺癌患者中，最多见的突变类型为19del(占56.10%)，其次为L858R(占34.15%)，随后是G719X(占6.50%)，其它类型较少见。见表1。

表1 肺腺癌患者突变情况

2.2 不同性别肺腺癌患者EGFR突变情况

男性肺腺癌患者EGFR突变率显著低于女性肺腺癌患者的突变率(P<0.01)。不同性别肺腺癌患者EGFR突变类型差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.3 不同年龄肺腺癌患者EGFR突变情况

<60岁组的肺腺癌患者EGFR突变率与≥60岁组无显著差异(P>0.05)。≥60岁组肺腺癌EGFR突变患者19del类型突变率显著低于<60岁组(P<0.01)，而L858R类型的突变率显著高于<60岁组(P<0.05)。见表3。

表2 不同性别肺腺癌患者EGFR突变情况

注：与女性组比较，1)P<0.05

表3 不同年龄肺腺癌患者EGFR突变情况

注：与<60岁组比较，1)P<0.05，2)P<0.01

2.4 是否发生转移肺腺癌患者EGFR突变情况

EGFR的突变与肺腺癌是否发生转移不存在显著差异(P>0.05)。是否发生转移肺腺癌患者EGFR突变类型差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。

表4 是否发生转移肺腺癌患者EGFR突变情况

3 讨 论

EGFR是一种跨膜受体酪氨酸激酶，该区域的激活对癌细胞增殖、生长的相关信号传递具有重要意义[5]。EGFR基因突变发生率在腺癌中较高[6]，在一线治疗的NSCLC患者中检测EGFR基因的突变状态具有重要的临床意义,是决定患者是否能够应用EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗的先决条件。

研究表明，在接受EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗的患者中，EGFR突变型患者疾病控制率明显优于野生型患者,其中19del类型突变的患者疾病控制率也明显优于L858R类型突变的患者[7]，因此，检测肺腺癌患者EFGR突变类型，对其指导用药具有重要意义。本研究显示，230例肺腺癌患者中，EGFR突变型患者占比53.58%，而这些突变型患者中，主要的突变类型集中在19del和L858R，表明肺腺癌患者主要的突变类型为19del和L858R，一半以上的肺腺癌患者更能从EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗中获益，与Paez等[8]的研究结果一致。研究发现EGFR基因突变导致EGFR酪氨酸激酶ATP结合位点的某些关键基团发生重构，增强了与ATP或其竞争性抑制剂吉非替尼等的相互作用[9]，这可能是EGFR突变型患者对吉非替尼等EGFR酪氨酸激酶抑制剂表现出更好疗效反应的可能原因之一。

肺癌的发病率存在性别差异，男性肺癌的发病率高于女性，但近年来女性肺癌的发病数量增长较男性快，肺癌表现出的性别差异可能与吸烟、空气污染及肺癌家族史有关[10]。本研究纳入的肺腺癌患者中，男性肺腺癌患者的突变率(43.08%)显著低于女性肺腺癌患者(65.42%)，与Shi等[11]的研究结果一致，但两者突变类型无显著差异，表明更多的女性肺腺癌患者可以从EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗中获益。有研究表明EGFR阳性表达率与肺癌相关危险因素相关，使用煤炉10年及以上者、吸烟10年及以上者、吸烟量超过10支/天者，由于这些因素长期作用于机体，造成EGFR基因的改变，阳性率升高[12]。据此可推测，女性肺腺癌患者由于居家烹饪、吸二手烟等因素可能较男性单纯吸烟者接触更多的肺癌相关危险因素，而这些因素可能会对EGFR的突变产生一定的促进作用，导致女性患者EGFR突变率高于男性，其具体机制有待进一步的研究。

Han等[13]、Liang等[14]等的报道中指出，EGFR突变率与年龄不存在相关性，这与本研究一致，但这些研究都未对EGFR的突变类型进一步的分类研究。本研究单独针对常见的EGFR突变类型与年龄的关系分析发现，<60岁组的EGFR突变型患者中，19del类型的突变比例(72.73%)显著高于≥60岁组(42.65%)，而L858R类型的突变比例(23.64%)显著低于≥60岁组(42.65%)，可见虽然突变率与年龄不存在相关性，但是突变类型与年龄存在一定的相关性。国内研究显示，汉族人群中EGFR 19del突变类型的NSCLC患者预后较L858R突变类型好[15]，结合本文结果，提示<60岁组的EGFR突变型肺腺癌患者的预后可能会较≥60岁组EGFR突变型肺腺癌患者好，因此临床上对于60岁及以上的EGFR L858R突变型肺腺癌患者的预后应该着重监测并加强相应的临床沟通。此外，本研究中还发现EGFR的突变与否与肺腺癌的转移不存在显著相关性，但有研究发现EGFR基因突变患者更易发生脑转移，接受酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine Kinase Inhibitors,TKI)及脑部放疗等治疗后，生存期更长[16]，因此，对于EGFR突变及其突变类型与转移部位的关系，值得进一步的深入研究。

综上所述，女性肺腺癌患者EGFR突变率高于男性，低年龄肺腺癌EGFR 19del突变率较高年龄肺腺癌患者高，这与目前临床上癌治疗效果女性优于男性，低年龄肺癌患者接受放化疗治疗预后较好的事实相符，然而男性肺癌的发病率较高，高年龄的肺癌患者也占半数以上，因此，针对男性和/或高年龄的肺癌患者的靶向治疗研究极为重要。

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