抗ds-DNA抗体及其分泌型B淋巴细胞对系统性红斑狼疮的病情监测

董晓微，郭 媛，刘 璐，张 静，王 伟

（宁夏回族自治区人民医院临床医学检验诊断中心，西北民族大学第一附属医院，银川 750002）

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种典型的系统性自身免疫性疾病，患者免疫炎性反应出现异常，患者体液或细胞免疫功能出现失调，血液中有多种具有免疫活性的抗体以及免疫复合物存在，最终损伤多个系统器官[1]。SLE患者病情严重，且病情变化较为复杂，临床需要对患者病情进行有效监测。在患者体征、临床症状出现前检测免疫活性抗体，可以有效监测患者的病情变化，从而有效调整临床治疗方案。抗ds-DNA抗体、抗史密斯抗体（smith antibody，Sm）、抗核小核抗体（antinuclear small nucleus antibody，AnuA）、以及抗核糖体P蛋白抗体（antibody against ribosomal P protein，ARPA）、抗磷脂抗体（antiphospholipid antibody，APA）等作为检测指标，随着研究的深入，ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞逐渐被认知，但目前国内研究还尚少[2]。本次研究针对抗ds-DNA抗体及抗ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞在SLE病情监测中的应用价值进行调查和研究，结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析宁夏回族自治区人民医院风湿免疫科2019年1月至2020年10月的临床资料，其中40例SLE患者为SLE组，男性患者10例，女性患者30例，平均年龄（39.26±2.11）岁；同期收治40例非SLE患者为非SLE组，其中男性患者12例，女性患者28例，平均年龄（40.21±1.82）岁；40例体检结果健康者为健康对照组，男性患者15例，女性患者25例，平均年龄（38.26±2.57）岁；各组研究对象基础资料比较差异均无统计学意义（P均＞0.05），具有可比性。所有研究对象同意参与本研究前均接受面谈，并签署知情同意书。

1.2 SLE组纳入、排除标准

纳入标准：1）符合临床SLE诊断标准[3]；2）患者无其他严重器官疾病；3）非合并恶性肿瘤；4）参与研究前未接受抗体药物治疗；5）自愿参与研究。排除标准：1）其他免疫性疾病；2）严重皮肤病；3）其他器官衰竭；4）传染性疾病；5）依从性较差；6）无法全程参与研究；7）同时参与其他同类型的研究。

1.3 研究方法

采集所有研究对象清晨空腹静脉血3.5 mL，转速3 500 r·min-1离心处理，分离血清待检测。1）抗体检测：采用欧蒙医学实验诊断股份公司生产的抗双链DNA抗体IgG检测试剂盒（酶联免疫吸附法）检测ds-DNA抗体；采用欧盟医学实验诊断股份公司生产的试剂盒（免疫印迹法）检测抗Sm抗体、AnuA、ARPA，严格根据试剂说明书进行标准操作。2）淋巴细胞检测：采用上海英骏生物技术有限公司生产人外周血淋巴细胞分离液、Cellix901细胞培养液。提取足够的淋巴细胞，并采用流式细胞分选法纯化分离B细胞，确保B细胞浓度≥95%，再进行细胞培养，收集细胞，应用BD FACSAriaTMⅡCell Sorter流式细胞分析仪检测抗ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞。并对最后检测结果进行记录[4]。对各组研究对象阳性率、三项指标以及联合指标检测结果进行对比和分析[5]。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.2统计学软件对数据进行分析，计数资料以率（%）表示，采用χ2检验；计量资料以均数±标准差（±s）表示，采用t检验；ROC曲线绘制对不同抗体检测结果进行计算。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组研究对象各项抗体阳性检出率对比

SLE组研究对象的ds-DNA抗体、ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞检测阳性率均高于非SLE组、健康对照组（P均＜0.05）；同时SLE组抗Sm、AnuA、ARPA三项抗体阳性率也均高于非SLE组、健康对照组（P均＜0.05），其中ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞检测阳性率最高（72.5%），见表1。

表1 三组各项抗体阳性检出率比较[例（%）］

2.2 SLE患者各项抗体检测结果

ds-DNA抗体、ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞的敏感性、阳性预报价值、阴性预报价值均高于其他几项抗体（P均＜0.05），见表2。

表2 SLE患者各项抗体检测究结果情况比较（%）

2.3 SLE患者各项抗体联合检测结果对比

ds-DNA抗体联合ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞的检测特异性、敏感性均优于其他指标联合检测的特异性、敏感性（P均＜0.05），见表3。

表3 SLE患者各项抗体联合检测结果比较（%）

3 讨论

SLE是一种累及多系统、多器官的自身免疫性疾病，目前SLE的发病机制尚不明确，其发病多集中在女性患者。近几年我国临床上SLE患者的人数明显增加，轻型、早期患者临床症状表现并不明显，因此临床上SLE的诊断工作难度也更高[6-7]。

自身抗体属于免疫球蛋白的一种，SLE患者存在的自身抗体，会对其机体免疫功能造成影响，导致组织病变出现，且对自身组织成分产生免疫反应，最终造成患者自身免疫性损伤出现[8]。随着临床各种检测方式的改进，酶联免疫斑点法、免疫印迹法等可以提升自身抗体检测的效果[9]。ds-DNA抗体、ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞、抗Sm抗体等抗体，均是目前临床上对SLE患者病情监测的主要指标，但随着研究的深入，单项自身抗体指标的检测效果并不理想，因此临床开始尝试对自身抗体检测指标进行联合检测[10]。SLE组患者的ds-DNA抗体、ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞等检测阳性率均高于非SLE组、健康对照组；SLE患者的各项自身抗体指标检测阳性率高于其他非免疫性疾病患者以及健康人群，说明了在SLE患者的血清学免疫指标检测中，各项自身抗体指标均具有价值，尤其是针对患者病情发展进度的监测，效果更为明显[11]。进一步检测结果显示，ds-DNA抗体、ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞的诊断价值高于其他几项抗体诊断价值；ds-DNA抗体联合ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞的检测特异性、敏感性优于其他指标联合检测特异性、敏感性。无论是单项自身抗体检测，还是联合使用自身抗体检测，在SLE患者的诊断中，ds-DNA抗体及ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞的作用均较为明显，其中ds-DNA抗体主要分为IgG、IgM这两种，与SLE患者病情变化存在相关的主要是IgG，随着患者病情的发展，IgG水平值也增加，患者血清中所含ds-DNA抗体浓度出现提升，导致患者器官以及各系统受到的损伤较重，并降低患者生存概率[12]；ds-DNA抗体的发病机制，与患者受损器官、受损组织以及自身特征存在一定的相关性，ds-DNA抗体的变化，与患者最终病情发展的相关性也极高。大部分研究中均发现，ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞的变化，直接预示着SLE患者病情变化，结合所得研究数据可以确定，血液中不存在ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞的患者就不会出现病情变化[13]。ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞会随着患者病情变化而变化，原因是患者病情变化期间，患者血液中的相关抗原不断刺激机体，导致ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞增多。目前临床上部分的研究中有针对ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞为靶点进行生物制剂的研究，希望可以借此对SLE患者的病情进行有效控制[14-15]。

综述以上，SLE患者随着病情发展，ds-DNA抗体及ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞阳性检出率提高，在临床诊断中，ds-DNA抗体及ds-DNA抗体分泌型B淋巴细胞具有一定的诊断特异性、敏感度，联合检测所获得检测价值更优于其他指标，临床指导价值明显。