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杆状病毒

  • 昆虫杆状病毒及其应用研究进展
    物杀虫剂(如杆状病毒杀虫剂)因其具有特异性高、易于生物降解、对哺乳动物和环境都安全等诸多优点,在现代农业绿色防控中也逐渐受到重视[4-5]。但是野生型杆状病毒杀虫剂具杀虫谱窄、杀虫速度较慢等缺陷,这在很大程度上妨碍了其推广应用。针对野生型杆状病毒在应用中的不足之处,人们通过基因工程技术对其进行分子改良,有望改进这些缺点,从而增加这类杀虫剂的市场竞争力。本文综述了杆状病毒和其作为杀虫剂方面的应用、杆状病毒杀虫剂的生产工艺及在遗传改良方面取得的进展,同时对昆虫

    河南农业大学学报 2023年6期2024-01-01

  • H5亚型禽流感病毒HA蛋白在杆状病毒-昆虫细胞系统中的表达与纯化
    系统[8]、杆状病毒昆虫细胞表达系统[9]、病毒活载体系统[10]等,其中杆状病毒-昆虫细胞系统表达的蛋白因具有一定糖基化修饰、蛋白产量高、表达成本低、便于放大悬浮生产等优点而研究较多。本试验以H5亚型AIV国内流行分支clade 2.3.4.4d的HA基因为靶基因,通过杆状病毒-昆虫细胞表达系统进行表达,并利用Strep-tag亲和层析纯化重组蛋白,以提高HA蛋白纯度和回收率,保持HA蛋白的生物活性。本试验可为H5亚型AIV新型疫苗研发、HA单克隆抗体制

    动物医学进展 2023年10期2023-10-24

  • 杆状病毒诱导寄主行为研究进展
    进展1.1 杆状病毒诱导鳞翅目行为研究杆状病毒感染鳞翅目幼虫后会出现活动能力增强的现象，感染后的幼虫在死亡前迁移至植物的顶部并液化，以此增加病毒颗粒的释放，增大病毒的传播范围[5]。1943 年舞毒蛾的上爬行为被证明是杆状病毒所致；1981 年舞毒蛾幼虫的上爬行为首次被发现，感染的舞毒蛾幼虫在死亡前迁移至树梢，最后倒挂死亡。感染的舞毒蛾幼虫在死亡前迁移至树梢，最后倒挂死亡，称为树顶病或树梢病，后期比较统一的叫树顶病[6-8]。在首次量化杆状病毒在鳞翅目系统

    南方农业 2023年13期2023-10-16

  • 杆状病毒诱导寄主行为研究进展
    机制，总结了杆状病毒诱导鳞翅目行为和其他寄生物诱导寄主行为的研究进展，分析了egt基因、ptp基因和光照在杆状病毒诱导鳞翅目上爬行为中的作用及杆状病毒诱导舞毒蛾上爬行为机制，探讨杆状病毒诱导鳞翅目幼虫上爬行为致病机制。关键词 杆状病毒；行为调控；树顶病；egt基因；ptp基因中图分类号：S476+.13 文献标志码：C DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2023.13.002寄生物通过操控寄主一系列行为变化来促进自己的传播和扩散。

    南方农业·上旬 2023年7期2023-10-09

  • 杆状病毒miRNA研究进展
    调控[3]。杆状病毒(Baculovirus)是一类具有杆状核衣壳的双链DNA病毒，具有嚢膜包裹，其整个生命周期会产生出芽型病毒(budded virion，BV)和包涵体衍生型病毒(occlusion-derived virion，ODV)2种形态的病毒粒子，分别具有不同的生物学意义[5]。杆状病毒的宿主范围包括鳞翅目、膜翅目和双翅目等昆虫，是自然环境中昆虫种群和数量的重要调节因子[6-10]。因此，其对农业害虫防治具有重要的研究应用价值，已被开发为生物

    农业与技术 2023年1期2023-01-31

  • MicroRNA 在杆状病毒侵染过程中的功能研究进展
    RNA，包括杆状病毒[14]。昆虫杆状病毒隶属于杆状病毒科，因其具宿主专一性，可被研制成对环境安全的病毒杀虫剂[15]。杆状病毒感染昆虫宿主后改变宿主体内miRNA 的表达谱，一方面，病毒利用miRNA 操纵宿主和自身基因的表达；另一方面，宿主利用miRNA 以抗病毒的作用方式改变病毒对宿主细胞的感染[16]。杆状病毒-昆虫的相互作用在农林业、基因治疗和基因工程疫苗等方面具有重要的应用价值，而miRNA 是杆状病毒中研究较少的调节性RNA，在害虫防治、益虫

    河南农业科学 2022年10期2022-12-20

  • 杆状病毒载体灭活方法的研究进展
    33000）杆状病毒基因组为大型环状闭合双链DNA结构，杆状病毒科包含颗粒体病毒属（Granulovirus, GV）和核型多角体病毒属（Nucleopolyhedrovirus, NPV），形态表现为杆状，宽约30～60 nm，长约250～300 nm，主要以包涵体来源病毒（Occlusionderivedvirus, ODV）和出芽型来源病毒（Buddingvirus, BV）[1]。昆虫细胞杆状病毒表达系统（Insect cellbaculoviru

    山东畜牧兽医 2022年10期2022-12-06

  • N9亚型禽流感病毒NA蛋白在昆虫细胞中的表达与鉴定
    。本研究利用杆状病毒—昆虫细胞表达系统表达具有反应原性的AIV N9 蛋白，为其N9 抗体检测试剂盒的研发奠定物质基础。1 材料与方法1.1 主要实验材料重组质粒pCAGGS-N9（N9 基因来自DK/HuN/S11670/2015（H11N9））、sf21 细胞、pFastBacHT A 和鼠源N9 蛋白单克隆抗体（MAb）由本实验室保存；DH5α 和DH10Bac 感受态细胞均购自生工生物工程（上海）有限公司；昆虫细胞转染试剂Cellfectin、Gr

    中国预防兽医学报 2022年7期2022-10-06

  • 杆状病毒新的分类地位和书写方式
    38000）杆状病毒是一类专一性寄生昆虫的病毒，其病毒粒子呈杆状，具有囊膜结构，基因组为闭合环状双链DNA，大小为80～180 kb，编码100～200个基因，核衣壳直径约30～60 nm、长度约250～300 nm[1]。杆状病毒由于对宿主的高度特异性，已经被作为高效、安全的生物杀虫剂广泛应用[2]。杆状病毒还被开发成为用于外源基因的高效真核表达载体以及新型基因治疗载体[3]。在2020年以前，杆状病毒只分类到科。2020年国际病毒分类委员会（Inter

    中国生物防治学报 2021年4期2021-10-22

  • 重组H5N1 流感血凝素杆状病毒滴度荧光定量PCR检测方法的建立、验证及应用
    100176杆状病毒表达载体系统（baculovirus expressionvector system，BEVS）是以杆状病毒为外源基因载体，以昆虫细胞为受体的一种真核表达系统，具有效率高、容量大、表达产物能进行折叠和修饰等特点［1-3］。自20 世纪80 年代建立以来，BEVS 已经发展为成熟的生物制品生产平台，有多种产品获批，包括兽用疫苗、人用疫苗及治疗产品［4-8］。杆状病毒不会刺激哺乳动物产生强烈的免疫应答，也不会对其造成功能性损伤，这些特性使其

    中国生物制品学杂志 2021年10期2021-10-20

  • 高密度悬浮转染方式高效获得重组杆状病毒
    71003)杆状病毒表达载体系统(Baculovirus expression vector system, BEVS)是近年来被广泛用于高效表达外源蛋白的载体系统，为重组蛋白单体、多聚体蛋白复合物、病毒样颗粒、膜蛋白以及对哺乳动物细胞有毒的蛋白提供了通用的表达平台，广泛应用于医学、农学和兽医学等各个领域[1]。相对于原核、酵母和CHO等表达系统，BEVS具有一定优势：杆状病毒专一寄生于无脊椎动物，安全性高；可对重组蛋白进行正确折叠和翻译后修饰，获得具有生

    畜牧与兽医 2021年8期2021-08-06

  • 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白在昆虫细胞中的可溶性表达
    获得4株重组杆状病毒，获得了可溶性表达的GP5蛋白，证明其具有的较好抗原性。1 材料与方法1.1 主要材料pFastBacTMDual表达系统和Lipofectamine 3000为Invitrogen公司产品。PRRSV阳性血清为本实验室制备保存。His单克隆抗体购自翼飞雪生物科技有限公司。SPA-HRP、羊抗小鼠IgG-HRP购自武汉博士德生物工程公司。Sf-900Ⅲ SFM无血清培养基为Gibco公司产品。Mini plasmid、DNA凝胶回收试剂

    畜牧与兽医 2021年6期2021-05-28

  • p53 基因重组杆状病毒载体的构建与表达的研究
    45001)杆状病毒是一种基因组为80 ～160 kb 的环状DNA 双链病毒。根据包涵体的形态和病毒诱导的细胞病理学特征，杆状病毒分为核多角体病毒属（nucleopolyhedrovirus,NPV）和颗粒病毒属（granulovirus, GV）。杆状病毒表达系统（baculovirus expression vector systerm, BEVS）是一种利用杆状病毒作为载体，转染昆虫培养细胞或虫体中表达外源蛋白的真核表达系统。杆状病毒具有宿主专一性

    医药前沿 2021年6期2021-05-24

  • 利用杆状病毒实现外源基因在哺乳动物细胞内表达
    34025）杆状病毒是一类专职感染无脊椎动物的病毒，病毒呈杆状，具有囊膜。在其生活周期中共产生两种形态不一的病毒粒子，出芽型病毒粒子和包埋型病毒粒子，分别负责病毒的口服感染和系统感染两个环节［1］。杆状病毒的基因组为双链环状DNA，大小为80～180 kb，编码150 多个病毒蛋白。杆状病毒分为4 个病毒属：甲型、乙型、丙型和丁型［2］。杆状病毒是目前应用最广泛的病毒之一。作为安全、高效的生物杀虫剂被广泛应用于农林业病虫害的防治［3，4］；作为表达载体实现

    湖北农业科学 2020年23期2020-12-30

  • 蓝舌病病毒血清8型NS3蛋白在昆虫杆状病毒系统中的表达与鉴定
    试验利用昆虫杆状病毒系统表达蓝舌病病毒8型NS3蛋白，并通过间接免疫荧光、Western Blot和间接ELISA等手段对其反应原性进行鉴定。1 材料与方法1.1 菌株、血清和细胞 pFastBac-HTA质粒为Invitrogen公司产品；BTV绵羊阳性血清、兔抗蓝舌病病毒NS3蛋白(原核表达)多抗和昆虫细胞Sf9均由本实验室保存。1.2 主要试剂 Cellfectin®II Reagent、SF-900Ⅲ培养基、PureLinkTMHiPure质粒纯化

    中国兽医杂志 2020年4期2020-09-29

  • 内皮抑素和血管抑素融合基因在杆状病毒中的表达及抗肝癌效果评价
    病原体相比，杆状病毒是一种昆虫病毒，对哺乳动物和人类无致病性，但能有效进入多种哺乳动物细胞这一特点使其成为良好基因传递潜能的载体。因此，本研究为了提高抗血管生成基因治疗的效果和安全性，拟以杆状病毒为载体，表达由人内皮抑素和血管抑素组成的融合蛋白（human endostatin and angiostatin，hEA），以此来评价杆状病毒介导的hEA 的抗血管生成功能和抗肝癌效果。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 质粒、菌株和细胞pFastBac DU

    实用医学杂志 2020年15期2020-08-26

  • 重组杆状病毒载体在基因治疗中的应用*
    、细菌载体、杆状病毒等新的载体。但是实现外源基因长期稳定的表达、靶向性的表达还需进行更多的探索和研究[1]。本文对近年来重组杆状病毒基因治疗载体的研究以及其在癌症基因治疗中的应用进行总结。1 重组杆状病毒及其表达系统杆状病毒是一种环状、闭合双链DNA病毒，基因组大小为80～160 kb[2]，编码90～180个蛋白，在已测序的杆状病毒中发现31个核心基因[3]。根据包涵体的形态和病毒诱导的细胞病理学特征，杆状病毒分为核多角体病毒属(NPV)和颗粒病毒属(G

    国际检验医学杂志 2020年14期2020-03-06

  • 人IER5基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达与鉴定
    Sf9细胞；杆状病毒表达系统；鉴定早期快速反应基因5(immediate-early response gene 5，IER5)是早期慢反应基因家族的一员，最早是由Williams等人发现并命名[1]。该基因位于1号染色体长臂2区5带3亚带(1q25.3)，含2 350个核苷酸，无内含子。IER5基因的开放阅读框编码327个氨基酸，和其他早期慢反应基因家族pip92、IER2、ETR101一样，氨基酸末端含丰富的脯氨酸，但与pip92、IER2、ETR10

    癌变·畸变·突变 2020年1期2020-02-12

  • 杆状病毒在癌症基因治疗方面的应用
    心技术之一，杆状病毒一直就是备受关注的一类基因转导载体。经过研究者们的深入研究发现，杆状病毒在肝癌、胃癌、黑色素瘤及脑肿瘤等的基因治疗中具有较强的可行性。目前还可以进一步解决杆状病毒引起的体内补体反应，同时也能不断提高其转导和表达效率。本文将着重介绍杆状病毒在癌症基因治疗中的应用。【中图分类号】R730.5      【文献标识码】A      【文章编号】1672-3783（2019）03-0073-011 杆状病毒1.1杆状病毒杆状病毒是节肢动物的病源

    健康必读（上旬刊） 2019年3期2019-10-15

  • 猪流行性腹泻病毒S1-NTD蛋白表达及其免疫原性研究
    内[16]。杆状病毒是昆虫的病原体，其所具有的一些典型特征(如在晚期基因高水平表达)使其非常适合作为外来基因表达的载体[17-18]。为推进PEDV基因工程疫苗的探索和创新，本研究利用昆虫杆状病毒表达系统表达PEDV S1-NTD蛋白，并验证了其免疫原性，旨在为利用昆虫杆状病毒表达系统制备PEDV基因工程亚单位疫苗提供依据。1 材料与方法1.1 材 料pFastBac Dual载体、大肠杆菌K-12菌株TG1、大肠杆菌DH5α、大肠杆菌DH10Bac、昆虫

    西北农林科技大学学报（自然科学版） 2019年9期2019-09-25

  • 蓝舌病病毒血清I型VP2与VP5、VP3与VP7两组蛋白在杆状病毒系统中的表达与鉴定
    以及通过昆虫杆状病毒表达系统制备的类病毒颗粒（virus-like particles，VLP）亚单位疫苗[5]等报道。我国存在多种BTV血清型毒株的流行，不同血清型BTV毒株对绵羊的致病性存在较大差异。BTV1型为我国广泛流行的血清型之一，对绵羊具有较强的致病性[13]，因此开发安全高效的BTV1型疫苗，对我国BT防控具有重要意义。本实验室前期成功开发了BTV1型灭活疫苗，并在绵羊上取得了良好的免疫保护效果[14]。但BTV1型基因工程疫苗的研究在我国尚

    中国动物检疫 2019年5期2019-05-21

  • 昆虫杆状病毒表达载体系统在疫苗研究中的应用进展
    少伟,昆虫杆状病毒表达载体系统在疫苗研究中的应用进展荣芮1，李婷婷1，张玉云2，顾颖1,2，夏宁邵1,2，李少伟1,21 厦门大学 生命科学学院 国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心，福建 厦门 361102 2 厦门大学 公共卫生学院 分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室，福建 厦门 361102荣芮, 李婷婷, 张玉云, 等. 昆虫杆状病毒表达载体系统在疫苗研究中的应用进展. 生物工程学报, 2019, 35(4): 577–588.Rong R

    生物工程学报 2019年4期2019-04-23

  • 血清4型禽腺病毒fiber-2基因在昆虫细胞中的表达及其免疫原性分析
    本研究拟利用杆状病毒表达系统和悬浮培养工艺克隆和表达FAdV-4 fiber-2蛋白，并对其进行初步的免疫效力评价，为研制FAdV-4亚单位疫苗研究提供实验依据。1 材料与方法1.1 主要实验材料 FAdV-4由本实验室分离并保存；Bac-to-Bac表达系统购自Invitrogen公司；Sf9细胞、High Five细胞均为本实验室保存；pMD19-T质粒、TaqDNA聚合酶、DNA Marker、T4连接酶均购自TaKaRa公司；质粒小提质粒试剂盒、A

    中国预防兽医学报 2019年12期2019-04-17

  • 鸡GM-CSF和IL-2增强表达新城疫病毒F蛋白的重组杆状病毒疫苗的免疫效果
    F蛋白的重组杆状病毒疫苗的免疫效果于航，高冬妮，申燕，刘颖，平文祥，葛菁萍黑龙江大学 生命科学学院 微生物省高校重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150080于航, 高冬妮, 申燕, 等. 鸡GM-CSF和IL-2增强表达新城疫病毒F蛋白的重组杆状病毒疫苗的免疫效果. 生物工程学报, 2018, 34(9): 1442–1452.Yu H, Gao DN, Shen Y, et al. Efficacy enhancement of a Baculovirus-

    生物工程学报 2018年9期2018-10-08

  • 昆虫杆状病毒基因组学研究进展
    50002)杆状病毒属于杆状病毒科(Baculoviridae)，是一类寄生于节肢动物(Arthropoda)的专一性病原微生物，其宿主主要是鳞翅目(Lepidoptera)、膜翅目(Hymenoptera)和双翅目(Diptera)的昆虫。已经完成测序的基因组大小为80～180 kb不等，编码89～181个开放阅读框(ORF)[1]，被包裹在长度为230～385 nm、直径为40～60 nm的杆状核衣壳中[2-3]。目前已从800多种昆虫中分离鉴定出60

    河南农业科学 2018年9期2018-09-28

  • 驱动蛋白Kif4A杆状病毒表达系统的构建与优化
    隆，抽提得到杆状病毒基因组。由于杆状病毒基因组较大，标准的转染方法转染效率较低，对该方法进行了优化。将杆状病毒基因组通过标准的和优化的转染方法转染到草地夜蛾卵巢细胞SF9中，经培养得到表达驱动蛋白Kif4A的初代杆状病毒。结果 通过检测初代杆状病毒的滴度， 我们发现，与标准的转染方法相比，优化的转染方法所得到的初代杆状病毒的滴度更高，相同稀释度感染条件下表达的Kif4A蛋白水平更高。结论 本研究成功构建了Kif4A杆状病毒表达系统，并优化了SF9细胞转染的

    科技资讯 2018年27期2018-03-26

  • 昆虫杆状病毒表达系统在动物疫苗研究的应用
    5)0 引言杆状病毒表达系统自建立以来广泛应用于生物检测、疫苗生产、基因治疗等方面。昆虫细胞-重组杆状病毒系统提供了一种蛋白质生产系统，生产可溶形式的重组蛋白，并能高效表达。表达的蛋白质具有大多数的翻译后修饰的功能，因此产生的膜蛋白具有正确的折叠构象，这是该方法优于原核表达系统的主要特点[1]。昆虫杆状病毒表达系统主要是针对杆状病毒构建载体，与哺乳动物细胞表达系统相比大大缩短了从基因克隆到蛋白表达的时间。杆状病毒基因组较大，能够克隆大的DNA片段，从而能够

    畜禽业 2018年6期2018-02-12

  • 兔病毒性出血症重组杆状病毒HP-VP60的构建及鉴定
    0蛋白的重组杆状病毒HP-VP60，并对其表达产物的血凝效价及免疫原性等进行鉴定，结果显示该重组杆状病毒的表达产物具有良好的免疫原性，可用于制备RHDV亚单位疫苗。1 材料与方法1.1 质粒、菌种和细胞 pT-VP60质粒（含有RHDV LQ株VP60基因）由华派生物质检研发中心构建；pFastBacDual杆状病毒转移载体、DH10Bac感受态细胞和Sf9细胞由华派生物质检研发中心保存。1.2 主要试剂 DNA凝胶回收试剂盒、质粒提取试剂盒、醋酸纤维素膜

    四川畜牧兽医 2018年1期2018-01-17

  • 昆虫杆状病毒表达载体系统的应用与展望
    摘 要：昆蟲杆状病毒表达载体系统具有生物安全性高、能容纳较大外源基因片段并实现多基因共表达、有完备的翻译后加工修饰系统等特点，因而得到广泛的应用。近年来，随着重组杆状病毒构建技术、昆虫细胞培养技术的不断发展和改进，加大了昆虫杆状病毒表达载体系统在疫苗制备、治疗性抗体、药物研发和基因治疗中的应用力度。本文综述了杆状病毒表达载体的研究现状和应用范围，讨论了目前杆状病毒表达载体重组蛋白易降解的问题。随着科技的进步，对杆状病毒载体的研究与优化会更加深入，昆虫杆状病

    中国科技纵横 2017年22期2018-01-04

  • 昆虫杆状病毒组学研究进展
    002)昆虫杆状病毒组学研究进展梁振普，李路军，张俊庆，刘雅静，吴 慧，李鹏娟，冯文霞，张小霞*(河南农业大学 生命科学学院，河南 郑州 450002)杆状病毒(baculoviruses)是一类专性感染无脊椎动物的共价闭合双链环状DNA昆虫病毒。由于杆状病毒对环境和人畜无害，其作为生物农药在生物防治方面发挥着重大作用。此外，杆状病毒还可作为一种真核表达载体，广泛用于药物研发、疫苗生产,以及作为基因转移载体用于基因治疗等方面。综述了杆状病毒的基因组学及蛋白

    河南农业科学 2017年8期2017-09-01

  • 昆虫杆状病毒egt基因研究进展
    058）昆虫杆状病毒egt基因研究进展王海萍，吴小锋＊（浙江大学 动物科学学院，浙江 杭州 310058）杆状病毒是一类大分子的双链环状DNA病毒，其编码的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因（egt）在感染昆虫后表达产生EGT酶。EGT酶的催化使宿主体内的蜕皮激素失活，阻止幼虫蜕皮，从而利于病毒自身的繁殖。已有研究发现，敲除egt基因的杆状病毒感染的昆虫，死亡时间缩短，向上攀爬行为减弱。最近的研究还表明转egt基因的家蚕蚕蛹发育迟缓。从分子水平对EGT酶

    蚕桑通报 2017年1期2017-08-16

  • 杆状病毒ctl基因的进化分析
    值。为了揭示杆状病毒ctl基因的进化特点，对杆状病毒CTLs进行多序列比对分析和分类研究。结果表明，杆状病毒CTLs可分为Ⅰ型、Ⅱ型，2种类型的CTLs都具有相同的二硫鍵骨架，但涉及昆虫酚氧化酶抑制剂活性的酪氨酸残基在2种类型CTLs中的数目、位置明显不同；另外，Ⅰ型CTLs、Ⅱ型CTLs的理化性质也存在明显差异，疏水性氨基酸平均含量分别为29.7%、21.3%，净电荷平均值分别为-3.56、+0.507，等电点平均值分别为3.86、7.32。由此推测，Ⅰ

    江苏农业科学 2017年9期2017-07-15

  • 狂犬病病毒磷蛋白在杆状病毒中的表达及鉴定
    病毒磷蛋白在杆状病毒中的表达及鉴定郑光来1，卢晓冉2，张永武2，张静远2，陈 腾2，王东方2，严 妍2,3，张守锋2，扈荣良1*(军事医学科学院军事兽医研究所，吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室，吉林长春 130122)采用RT-PCR方法扩增出狂犬病病毒BD06株的磷蛋白(P)基因片段，将其插入杆状病毒穿梭载体pFastBac 1获得的pFastBac 1-P重组质粒，转化E.coliDH10Bac成功构建出杆状病毒表达质粒Bacmid-P，用脂质体介

    动物医学进展 2016年5期2017-01-06

  • 重组杆状病毒表达Sf-caspase-1双链RNA对昆虫细胞凋亡的影响
    00)重组杆状病毒表达Sf-caspase-1双链RNA对昆虫细胞凋亡的影响欧艳梅，许晓东(西北农林科技大学 生命科学学院，陕西 杨凌 712100)【目的】 构建包含Sf-caspase-1反向重复序列的重组杆状病毒vAcMNPV-dsCasp，并在草地贪夜蛾(Sf9)细胞中表达Sf-caspase-1双链RNA，用以抑制Sf9细胞的凋亡，为未来优化杆状病毒表达系统提供试验依据。【方法】 将Sf-caspase-1反向重复序列构建到pBac5上，与Ac

    西北农林科技大学学报（自然科学版） 2016年11期2016-12-16

  • 含FMDV中和表位的重组病毒颗粒的构建及鉴定
    构建对应重组杆状病毒，分别命名为reBAC-CAP-B，reBAC-CAP-BTB.将上述病毒颗粒转入Sf9细胞表达，收获重组杆状病毒并再次感染Sf9细胞扩大病毒滴度，获得目的蛋白CAP-B，CAP-BTB，经过SDS-PAGE，Western blot鉴定正确，透射电镜观察到20～30 nm大小的目的颗粒.关键词:口蹄疫病毒； 猪圆环病毒； 病毒样颗粒； 抗原表位； 杆状病毒-昆虫细胞表达系统口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease， FMD

    复旦学报（自然科学版） 2016年3期2016-07-28

  • 施马伦贝格病毒核蛋白在昆虫细胞中的表达
    其克隆于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTB，然后以该重组质粒转化DH10Bac感受态细胞，得到重组穿梭质粒Bacmid-SBV-N，将该重组穿梭质粒在脂质体介导下转染Sf 9昆虫细胞，得到表达SBV重组N蛋白的杆状病毒。通过SDS-PAGE和Western blot对重组N蛋白进行鉴定，表明该蛋白得到表达。本研究为以SBV核蛋白为基础的相关检测方法的建立提供了物质基础。关键词：施马伦贝格病毒；核蛋白；杆状病毒；昆虫细胞；表达施马伦贝格病（SB）是一

    中国动物检疫 2016年1期2016-07-25

  • 基于宿主细胞中磷脂“自然嵌合”的杆状病毒叶酸修饰
    自然嵌合”的杆状病毒叶酸修饰王丽英，文莉，吕诚，林毅，庞代文(武汉大学生物医学分析化学教育部重点实验室，化学与分子科学学院，病毒学国家重点实验室，高等研究院，武汉430072)关键词杆状病毒;叶酸;修饰;磷脂;宿主细胞中图分类号O652文献标志码A联系人简介:林毅，女，博士，副教授，主要从事表面分析化学及纳米生物技术研究.E-mail: ylin@ whu.edu.cn杆状病毒是节肢动物特异性的DNA病毒，具有载体容量大、增殖滴度高、易于大量扩增且对脊椎动

    高等学校化学学报 2016年2期2016-03-21

  • 多角体包埋异源蛋白杆状病毒表达系统的构建
    包埋异源蛋白杆状病毒表达系统的构建郭建军， 袁 林， 曾 静， 魏国汶， 杨一兵(江西省科学院微生物研究所，江西南昌 330096)摘要[目的]探索多角体病毒的包装特性，构建能形成多角体包裹外源蛋白的polyh+Bac-to-Bac表达系统。[方法] 通过酶切连接的方式，将4个元件片段：作为标记的绿色荧光基因EGFP，BmCPV自身的多角体蛋白基因，用于基因表达的H1信号肽柔性连接肽， 插入到质粒FastBacDual 中，利用AcMNPV Bac-to-

    安徽农业科学 2016年2期2016-03-04

  • 人乳头瘤病毒18型L1蛋白在昆虫杆状病毒系统中的表达
    靶抗原。昆虫杆状病毒表达系统具有磷酸化、糖基化和蛋白切割加工修饰等功能，表达产物的生物学特性与天然产物相似，安全性较高，制备过程简单，适用于蛋白质工程研发[3]。我们利用杆状病毒表达系统表达L1蛋白，为进一步研究新型HPV疫苗奠定基础。1 材料与方法1.1 材料昆虫细胞Sf9和载体pFastBac1购自美国Invitrogen 公司；大肠杆菌DH5α和DH10Bac 由本科室保存；L1基因根据NCBI 提供的HPV18 野生型L1基因序列（NC_00135

    生物技术通讯 2015年6期2015-11-29

  • 杆状病毒的DNA聚合酶
    006)1 杆状病毒杆状病毒 (Baculovirus)是一类感染无脊椎动物的病原微生物，其基因组为闭合双链环状DNA，病毒粒子呈杆状，其基因组大小一般为80－180 kb，编码90－180个基因。杆状病毒分为4个属:α杆状病毒属、β杆状病毒属、γ杆状病毒属与δ杆状病毒属 (King et al.，2012)。杆状病毒在一个病毒复制周期内产生两种不同形态、不同功能的病毒，即芽生型病毒 (budded virus，BVs)和包埋型病毒 (occlusion

    环境昆虫学报 2015年2期2015-11-22

  • 猪圆环病毒 2 型Cap蛋白在杆状系统中的表达与纯化
    中，获得重组杆状病毒。经过噬斑克隆实验，获得稳定、高效表达Cap蛋白的重组杆状病毒，病毒滴度可达到1×109pfu/mL。免疫印迹实验表明重组Cap蛋白可与PCV2 阳性血清发生特异性反应， 证明该重组蛋白具有良好的免疫活性反应。本研究为提高PCV2灭活疫苗病毒滴度及免疫原性奠定了基础。猪圆环病毒2型；杆状病毒；噬斑；纯化猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2，PCV2）感染可引起断奶仔猪多系统综合征（postweaning m

    中国动物传染病学报 2015年4期2015-11-19

  • 重组鸭干扰素的研发及其在鸭病防治中的应用
    1.3 重组杆状病毒的获得 提取高质量的重组Bacmid质粒，在脂质体介导下转染sf9细胞，盲传3代后，提取病毒2.2 重组Bacmid质粒EcoRⅠ、SalⅠ双酶切PMDDIFN-γ，将DIFN-γ克隆至供体质粒pFastBacTM1EcoRⅠ、SalⅠ位点。将重组供体质粒转化DH5α感受态细胞，通过Amp+抗性筛选阳性克隆，碱裂解法提取质粒。重组质粒pFBac-DIFN-γ经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切，消化得到约4760bp和550bp两个片段(图2)

    山东畜牧兽医 2015年8期2015-06-11

  • 杆状病毒囊膜蛋白介导病毒侵染宿主细胞中的作用
    02460）杆状病毒（Baculovirus）是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒，在分类学上属于杆状病毒科（Baculoviridae），其宿主主要包括鳞翅目（Lepidoptera）、膜翅目（Hymenoptera）和双翅目（Diptera）昆虫。基于杆状病毒全基因组序列构建的系统进化树，将杆状病毒科划分为4 个属：Alpha 杆状病毒属（以鳞翅目昆虫为特异宿主的NPV），Beta杆状病毒属（以鳞翅目昆虫为特异宿主的GV），Gamma杆状病毒

    中国兽医杂志 2015年1期2015-01-25

  • 扬州优邦生物公司猪圆环疫苗获批
    圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗（CP08 株）获批。猪圆环病是全球公认的危害养猪业的重大经济影响性疾病，优邦公司联合研制的猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗（CP08株），采用领先的重组杆状病毒-昆虫细胞（Sf9）基因工程表达技术和悬浮培养工艺，是基因工程真核表达亚单位疫苗。据悉，优邦公司为该产品累计投入研发和技改资金约4900万元。

    中国饲料 2015年22期2015-01-25

  • 家蚕杆状病毒侵染机制研究获得新进展
    模式昆虫，与杆状病毒相互作用的研究具有多方面的应用价值。家蚕和杆状病毒相互作用机制的阐明对害虫的生物控制，外源蛋白的真核表达和宿主免疫抗性等方面都有十分重要的意义。西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室以杆状病毒和家蚕为模型，揭示病毒在侵染过程中与宿主的相互作用。该项研究是实验室继抗病毒育种研究之后，在病毒感染机制研究取得的又一重要成果。实验室通过分析杆状病毒易感品系和正常大造品系发现家蚕spry基因在易感品系中低表达。我们进一步通过细胞水平的干涉和过表达

    蚕学通讯 2014年3期2014-03-26

  • 鲤春病毒血症病毒糖蛋白在杆状病毒表达系统中的表达与鉴定
    病毒糖蛋白在杆状病毒表达系统中的表达与鉴定刘红1，郑晓聪2，于力2，王津津2，贾鹏2，何俊强2，史秀杰2，兰文升2，叶奕优2，刘荭2，吴志新1（1.华中农业大学水产学院，湖北武汉 430070；2.深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心，广东深圳 518001）本实验利用杆状病毒表达系统表达鲤春病毒血症病毒（SVCV）糖蛋白。将SVCV糖蛋白基因（G）插入到供体质粒pFastBacHTA中，再用构建的质粒pFastBac-G转化E. coli DH10

    中国动物检疫 2014年6期2014-02-24

  • 共表达PRRSV GP5和N蛋白重组杆状病毒的构建与鉴定
    。本研究利用杆状病毒双表达载体(pFastBacTMDual)同时表达HP-PRRSV GP5蛋白和N蛋白，以期更好的发挥PRRSV GP5、N抗原活性及协同作用，为PRRSV基因工程疫苗的研究奠定基础。1 材料与方法1.1 载体、细胞、菌株与病毒 杆状病毒载体pFastBacTMDual、昆虫 Sf9 细胞、E．coli DH10Bac购于美国Invitrogen公司。高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒广东分离株(PRRSV GD)由中国兽医药品监察所提供。

    中国兽药杂志 2013年12期2013-11-23

  • 杆状病毒与宿主细胞的相互作用
    21000）杆状病毒是一类节肢动物病毒，具有高度的宿主特异性，主要寄生于鳞翅目，膜翅目和双翅目昆虫，其基因组为一个环状的双链DNA分子，大小约80～180 kb.杆状病毒包括两个属：核型多角体病毒属（NPV）和颗粒体病毒属 （GV）.杆状病毒在复制时产生两种形态和功能都有差异的病毒粒子，即有两种表现型：芽殖型病毒体 （budded vir us，BV）和包含体来源型病毒体 （occl usion，ODV）.病毒感染宿主细胞早期，主要产生病毒粒子BV，到了感

    河北北方学院学报（自然科学版） 2012年2期2012-08-15

  • 家蚕杆状病毒表达系统研究进展
    018)家蚕杆状病毒表达系统研究进展寿 鑫1，应慧慧1，李 擎1，于 威1,2，张耀洲1,2(1.浙江理工大学 生命科学学院，杭州 310018；2.浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室，杭州 310018)近年来家蚕杆状病毒表达系统在应用和优化等方面研究有了新进展。家蚕杆状病毒表达系统利用携带外源目的蛋白基因的重组杆状病毒对家蚕及其细胞系的高效感染能力，在感染后的家蚕体内或培养细胞中大量表达目的蛋白。家蚕作为一种外源蛋白表达载体，具有与哺乳动物细胞类

    丝绸 2012年9期2012-08-15

  • 杆状病毒表达载体在医学领域中的应用进展
    表达系统，即杆状病毒表达系统(BEVS)，因其独特的生物学特性，在过去的20年里，已作为一种真核表达载体被广泛应用。本研究就该系统的主要特性、种类以及在医学领域中的应用等方面进行阐述。1 杆状病毒及其表达系统杆状病毒是一类专门寄生于节肢动物的病原微生物。目前全世界已发现600多种杆状病毒，其中研究最深入的是苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcNPV)。AcNPV病毒粒子成杆状，病毒囊膜直接包被着约130 kb的双链、环状DNA分子，其全基因组序列已经测定清楚。

    山东医药 2012年23期2012-04-13

  • 表面展示鸡传染性支气管炎病毒M 41株S1蛋白的重组假型杆状病毒的构建
    1-4］.在杆状病毒表面展示系统中用于和外源蛋白发生融合的囊膜糖蛋白gp64，是出芽型病毒(Budded virus，BV)特有的结构蛋白，由N末端信号肽和成熟蛋白(跨膜区TM和胞质区CTD)组成［5］，介导病毒和昆虫细胞的融合及侵染过程.gp64被开发成杆状病毒表面展示系统来展示不同的目的蛋白，外源基因片段插入到病毒囊膜蛋白的信号肽与成熟蛋白之间，表达加工时信号肽被切除，形成的N端融合蛋白借助杆状病毒稳定地表达并展示于感染细胞或病毒粒子的表面，筛选得到表

    华南农业大学学报 2012年3期2012-03-05

  • 重组杆状病毒杀虫剂的研究现状与展望
    3)利用昆虫杆状病毒(baculovirus)防治害虫是生物防治的一项重要内容，但与化学杀虫剂相比，野生型杆状病毒的杀虫谱窄、杀虫速度慢，局限了其在生物防治中的应用。针对野生型杆状病毒杀虫速度慢的不足，可通过现代分子生物技术对其进行改造，以加快其杀虫速度，从而构建出重组型的杆状病毒。1986年，英国牛津大学的Bishop等［1］首先开始进行应用昆虫专一性毒素基因重组杆状病毒增强病毒杀虫效果的试验。20世纪80年代末期以来，重组杆状病毒杀虫剂的研制成为生物防

    中国蚕业 2011年4期2011-02-10

  • 鼠IL-2基因的克隆及其杆状病毒表达载体的构建
    2复旦大学)杆状病毒是一类双链DNA大型病毒，能够感染600多种昆虫，可在感染的昆虫细胞中形成特征性的病毒包涵体。苜蓿银纹夜蛾多角体病毒(AcMNPV)是昆虫杆状病毒科核多角体病毒属的模式种，也是研究最多的杆状病毒。杆状病毒由于其自身的独特性使它成为一种新型的哺乳动物细胞基因表达和基因治疗的载体［1］。上世纪80年代建立的杆状病毒—昆虫细胞表达系统已经成为一种最常用的真核细胞表达系统。但是感染病毒作为哺乳动物细胞基因转移载体也有一些缺点:在体内会引起补体反

    山东医药 2011年4期2011-02-02

  • Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在BHK细胞表达鼠IL-2蛋白的研究*
    to-Bac杆状病毒表达系统在BHK细胞表达鼠IL-2蛋白的研究*黄大林 戴支凯 王 鑫 李彬彬 钟 江△目的：利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在BHK细胞表达重组鼠白细胞介素（IL）-2蛋白。方法：用Flag标记鼠IL-2并加入真核细胞启动子CMV，构建重组质粒pFB-CMV-IL-2并予酶切和PCR鉴定；将鼠IL-2克隆入杆状病毒表达载体pFastBacDual中，将pFB-CMV-IL-2转化到含杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感

    天津医药 2011年2期2011-01-05

  • 猪圆环病毒2型Cap蛋白在杆状病毒表面的展示
    较大的意义。杆状病毒对昆虫细胞的吸附和侵入与病毒的囊膜糖蛋白gp64有重要关系。gp64由N-末端信号肽和成熟蛋白(跨膜区TM和胞质区CTD)组成[1]。gp64被开发成杆状病毒表面展示系统来展示不同的目的蛋白,外源基因片段插入到病毒囊膜蛋白的信号肽与成熟蛋白之间,表达加工时信号肽被切除,形成的N端融合蛋白借助杆状病毒稳定地表达并展示于感染细胞或病毒粒子的表面,筛选得到表达有目的蛋白的重组杆状病毒。目前,杆状病毒表面展示系统已经被开发用于进行基因工程亚单位

    中国兽医杂志 2010年12期2010-11-22

  • 内源性禽白血病病毒ev/J gp85基因的表达
    因，通过构建杆状病毒转移载体pFastBac1-ev/Jgp85和重组杆状病毒穿梭载体Bacmid-ev/Jgp85，将ev/Jgp85基因转入Bac-to-Bac高效真核表达系统的Sf9 昆虫细胞进行真核表达。间接免疫荧光试验显示，构建的重组杆状病毒感染的Sf9细胞出现与野生型杆状病毒感染的Sf9细胞阴性对照明显不同的亮绿荧光；Western blot 分析DAB 显色，重组病毒感染的Sf9细胞蛋白显示出约35 ku的阳性条带。结果表明，内源性ev/Jg

    长江大学学报(自科版) 2009年2期2009-12-02

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